001 23358
002 7
004 B904D029-759A-4B3F-B24D-EF8DA19B8829
005 202103110909
008 081223s2020||||vm|#################vie#d
009 1 0
039 ## $a20210310180919 $bdtmkhue $y20210310174954 $zdtmkhue
082 ## $a660.6 $bLE-U
100 $aLê, Thị Tố Uyên
245 ## $aTách dòng và biểu hiện gen Pigi trong Escherichia Coli tham gia sinh tổng hợp prodigiosin từ chủng vi khuẩn Serratia Marcesence / $cLê Thị Tố Uyên; NHDKH TS. Đỗ Minh Trung
260 ## $aH. : $bTrường Đại học Mở Hà Nội, $c2020
300 ## $a76 tr. ; $cA4
490 ## $aBộ Giáo dục và Đào tạo; Trường Đại học Mở Hà Nội
520 ## $aMục tiêu nghiên cứu: - Nhân và tách dòng gen pigI từ Serratia marcesence. - Biểu hiện gen pigI trong E. coli. Phương pháp nghiên cứu: - Tách chiết DNA tổng số - Khuếch đại trình tự vùng gen đích - Chuẩn bị tb khả biến - Tách dòng gen trong vector pJET1.2 - Biểu hiện gen đích trong vi khuẩn E.coli Tiến hành các nghiên cứu ta có được các kết quả như sau: 1) Nhân gen và tách dòng gen pigI từ Serratia marcesence: - Nuôi cấy hoạt hóa được 3 chủng Serratia sp Q1, Serratia sp Q2, Serratia sp Q3 và xác định các chủng Serratia sp có khả năng sinh tổng hợp prodigiosin, các chủng này được sử dụng cho tách dòng gen tạo chủng vi khuẩn tái tổ hợp. - Khuếch đại thành công trình tự gen pigI của chủng Serratia sp Q1. Trình tự gen pigI của chủng nghiên cứu có mức độ tương đồng khá cao so với trình tự gen pigI của các chủng tham chiếu khác. Mức độ tương đồng lớn nhất lên tới 99,7% so với chủng S. marcescence CP027798, CP027796, CP021984 và CP003959 và nhỏ nhất là 97,6% so với chủng S. marcescence AJ833002. 2) Biểu hiện gen pigI trong Escherichia coli: - Sản phẩm PCR nhân gen pigI sau khi tinh sạch được nối ghép vào vector pJET22b. Vector tái tổ hợp được biến nạp vào tế bào khả biến E. coli BL21 (DE3). Biểu hiện thành công protein pigI, thu được protein có kích thước khoảng 58 kDa. - Điều kiện tối ưu để thu protein pigI tái tổ hợp là ở 25oC và nồng độ chất cảm ứng IPTG là 0,5mM. Có sự khác biệt không đáng kể về hàm lượng protein pigI thu được ở cả các nồng độ chất cảm ứng khác nhau. Từ kết quả nghiên cứu tách dòng và biểu hiện gen PigI trong Escherichia Coli tham gia sinh tổng hợp prodigiosin từ chủng vi khuẩn Serratia Marcesence được trình bày ở trên. Chúng tôi kiến nghị cần tiếp tục nghiên cứu đánh giá và khảo sát các điều kiện của protein pigI tái tổ hợp trong con đường chuyển hóa nhằm thu nhận và tăng sản lượng prodigiosin, đồng thời thử nghiệm thêm biểu hiện gen pigI trên các tế bào vật chủ khác để thu nhận prodigiosin có chất lượng tốt.
541 ## $aTài liệu nội sinh
653 ## $aprodigiosin
653 ## $agen Pigi
653 ## $aSerratia Marcesence
852 ## $a01 $bKho Luận văn $j(1): 01502928
856 1# $uhttp://thuvien.hou.edu.vn/houkiposdata2/luanvanluanankhoaluan/luanvan/2020/660.6/lethitouyen/lethitouyen_01thumbimage.jpg
890 ## $a1 $c1