Thông tin ấn phẩm
660.6 NG-L
Nghiên cứu lên men sinh tổng hợp và thu nhận axit clavulanic từ xạ khuẩn Streptomyces clavuligerus trên thiết bị 100 lít
Tác giả: Nguyễn, Thị Linh,
Nhà xuất bản
Trường Đại học Mở Hà NộiNăm xuất bản
2022Lần xuất bản
Đang cập nhậtNgôn ngữ
Tiếng ViệtTóm tắt
MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác định được điều kiện lên men (Nhiệt độ, tốc độ khuấy, nồng độ oxy, thời gian), hàm lượng dinh dưỡng (Nito, carbon và khoáng) để sinh tổng hợp Axit clavulanic quy mô 100 lít/mẻ. Bước đầu xây dựng quy trình lên men, tách chiết và thu
Đầu mục
Danh sách các kho đang có sẵn ấn phẩm
| Nơi lưu trữ | Có sẵn |
|---|---|
| Kho Luận văn | 1 |
Marc
Thông tin ấn phẩm theo chuẩn MARC 21
001
26522
002 7
004 6DA62BD4-1BA9-40FC-A2D0-3A621A9E74C9
005 202308081106
008 081223s2022||||vm|#################vie#d
009 1 0
039 ## $a20230808110657 $bdtmkhue $y20230728162729 $zdtmkhue
082 ## $a660.6 $bNG-L
100 $aNguyễn, Thị Linh
245 ## $aNghiên cứu lên men sinh tổng hợp và thu nhận axit clavulanic từ xạ khuẩn Streptomyces clavuligerus trên thiết bị 100 lít / $cNguyễn Thị Linh; NHDKH PGS.TS Tạ Thị Thu Thủy
260 ## $aH. : $bTrường Đại học Mở Hà Nội, $c2022
300 ## $a46 tr. ; $cA4
490 ## $aBộ giáo dục và Đào tạo; Trường Đại học Mở Hà Nội
520 ## $aMỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác định được điều kiện lên men (Nhiệt độ, tốc độ khuấy, nồng độ oxy, thời gian), hàm lượng dinh dưỡng (Nito, carbon và khoáng) để sinh tổng hợp Axit clavulanic quy mô 100 lít/mẻ. Bước đầu xây dựng quy trình lên men, tách chiết và thu nhận Axit clavulanic với thể tích lên men 100 lít. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU Xạ khuẩn S. clavuligerus tự nhiên cung cấp từ phòng thí nghiệm iBR – Khoa Hóa dược – Đại học Sunmoon, Hàn Quốc. Vi sinh vật kiểm định: + Vi khuẩn Gram (+): Staphylococcus aureus (S. aureus) + Vi khuẩn Gram (–): Escherichia coli JM109 (E. coli JM109) Các chủng vi sinh vật được cung cấp bởi Khoa Vi sinh-Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ương. KẾT QUẢ: Khi áp dụng các tốc độ khuấy khác nhau thì hàm lượng Axit clavulanic tạo ra cũng khác nhau. Điều này chứng tỏ sinh khối phụ thuộc đáng kể vào yếu tố này. Kết quả nghiên cứu đã cho thấy với tốc độ khuấy thích hợp nhất là 200 v/p hàm lượng axit đạt cao nhất 120,06 mg/ml và đồng thời sinh trưởng của Streptomyces clavuligerus cũng đạt cao hơn 19,02 g/l. Kết quả nghiên cứu cho thấy hàm lượng Axit clavulanic đạt 127,5 mg/l và sinh trưởng tế bào đạt 18.45 g/l với tốc độ cấp khí 0,7 lít khí/lít môi trường/phút. Trong khi đó hàm lượng CA đạt 95,6 mg/l và sinh khối tế bào đạt 19.36 g/l với lưu lượng cấp khí 1,0 lít khí/lít môi trường/phút. Tại thời gian nuôi được 84 giờ chủng đạt tốc độ sinh trưởng với sinh khối tế bào (19,05 g/l) và tạo kháng sinh đạt hiệu quả cao nhất (129,04 mg/l). Tuy nhiên sau 84 giờ hàm lượng axit giảm nhanh vì ở dạng tự do Axit clavulanic rất kém bền rất dễ biến tính và mất hoạt tính sau 78 giờ trong môi trường thường. Vì vậy cần phải xác định chính xác thời gian tạo Axit clavulanic hiệu quả nhất để thu hồi sản phầm. Xạ khuẩn S. clavuligerus tự nhiên nuôi trong môi trường giàu khoáng có hàm lượng glucose là 20 – 22 g/l tạo ra hàm lượng axit là nhiều nhất còn ở các môi trường giàu khoáng có hàm lượng glucose khác thì làm lượng axit được tạo ra là ít hơn. Như vậy, hàm lượng cacbonhydrat quá cao hay quá thấp đều ảnh hưởng rất lớn đến khả năng sinh axit của xạ khuẩn S . clavuligerus tự nhiên: hàm lượng cacbonhydrat quá thấp thì không đủ dinh dưỡng cho sự phát triển còn hàm lượng cacbonhydrat quá cao thì lại ức chế sự tổng hợp axit của chủng. Với hàm lượng pepton là 4g/l lượng axit đạt cao nhất cho dù tăng thêm lượng pepton nhưng hiệu suất không tăng nhiều. Vì vậy nhóm lựa chọn 4,0 g/l là hàm lượng thích hợp. Với hàm lượng MgCl2 là 2,0 g/l thì lượng Axit clavulanic thu được là 128,5 mg/l. Tiến hành tăng thêm lượng MgCl2 nhưng hiệu suất không cao hơn nhiều. Vì vậy lựa chọn 2,0 g/l là hàm lượng MgCl2 thích hợp. Khảo sát pH từ 6 đến 8, trọng lượng ướt thu được từ 15,12 đến 20,8 g/l và hàm lượng CA là 98,9 đến 127,8 mg/l.Kết quả cho thấy pH=6,5 thì hàm lượng CA đạt cao nhất, cụ thể là 130,7 mg/l. Do đó lựa chọn pH=6,5 để tiến hành nghiên cứu môi trường nuôi cấy xạ khuẩn KẾT LUẬN: Điều kiện thích hợp cho lên men xạ khuẩn S. Clavuligerus trên thiết bị 100 lít: Tốc độ khuấy 200 vòng/phút; tốc độ cấp khí 0,7 lít khí/lít môi trường/phút, pH ban đầu 6,5; nhiệt độ lên men là 280C, thời gian lên men 84 giờ. Đã nghiên cứu lựa chọn thành phần dinh dưỡng, điều kiện và xây dựng quy trình lên men xạ khuẩn S. clavuligerus với thiết bị lên men 100 lít trong đó: Môi trường AMP có hàm lượng chất dinh dưỡng gồm: Glucose 20 g/l; pepton 4 g/l; khoáng MgCl2 2 g/l. Đã xây dựng được quy trình lên men và thu nhận Axit clavulanic từ dịch lên men quy mô 100 lít/mẻ.
541 ## $aTài liệu nội sinh
653 ## $aaxit clavulanic
653 ## $amen sinh tổng hợp
653 ## $axạ khuẩn Streptomyces clavuligerus
852 ## $a01 $bKho Luận văn $j(1): 01503095
856 1# $uhttp://thuvien.hou.edu.vn/houkiposdata2/luanvanluanankhoaluan/luanvan/2023/660.6/nguyenthilinh/nguyenthilinh_01thumbimage.jpg
890 ## $a1 $c1
002 7
004 6DA62BD4-1BA9-40FC-A2D0-3A621A9E74C9
005 202308081106
008 081223s2022||||vm|#################vie#d
009 1 0
039 ## $a20230808110657 $bdtmkhue $y20230728162729 $zdtmkhue
082 ## $a660.6 $bNG-L
100 $aNguyễn, Thị Linh
245 ## $aNghiên cứu lên men sinh tổng hợp và thu nhận axit clavulanic từ xạ khuẩn Streptomyces clavuligerus trên thiết bị 100 lít / $cNguyễn Thị Linh; NHDKH PGS.TS Tạ Thị Thu Thủy
260 ## $aH. : $bTrường Đại học Mở Hà Nội, $c2022
300 ## $a46 tr. ; $cA4
490 ## $aBộ giáo dục và Đào tạo; Trường Đại học Mở Hà Nội
520 ## $aMỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác định được điều kiện lên men (Nhiệt độ, tốc độ khuấy, nồng độ oxy, thời gian), hàm lượng dinh dưỡng (Nito, carbon và khoáng) để sinh tổng hợp Axit clavulanic quy mô 100 lít/mẻ. Bước đầu xây dựng quy trình lên men, tách chiết và thu nhận Axit clavulanic với thể tích lên men 100 lít. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU Xạ khuẩn S. clavuligerus tự nhiên cung cấp từ phòng thí nghiệm iBR – Khoa Hóa dược – Đại học Sunmoon, Hàn Quốc. Vi sinh vật kiểm định: + Vi khuẩn Gram (+): Staphylococcus aureus (S. aureus) + Vi khuẩn Gram (–): Escherichia coli JM109 (E. coli JM109) Các chủng vi sinh vật được cung cấp bởi Khoa Vi sinh-Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ương. KẾT QUẢ: Khi áp dụng các tốc độ khuấy khác nhau thì hàm lượng Axit clavulanic tạo ra cũng khác nhau. Điều này chứng tỏ sinh khối phụ thuộc đáng kể vào yếu tố này. Kết quả nghiên cứu đã cho thấy với tốc độ khuấy thích hợp nhất là 200 v/p hàm lượng axit đạt cao nhất 120,06 mg/ml và đồng thời sinh trưởng của Streptomyces clavuligerus cũng đạt cao hơn 19,02 g/l. Kết quả nghiên cứu cho thấy hàm lượng Axit clavulanic đạt 127,5 mg/l và sinh trưởng tế bào đạt 18.45 g/l với tốc độ cấp khí 0,7 lít khí/lít môi trường/phút. Trong khi đó hàm lượng CA đạt 95,6 mg/l và sinh khối tế bào đạt 19.36 g/l với lưu lượng cấp khí 1,0 lít khí/lít môi trường/phút. Tại thời gian nuôi được 84 giờ chủng đạt tốc độ sinh trưởng với sinh khối tế bào (19,05 g/l) và tạo kháng sinh đạt hiệu quả cao nhất (129,04 mg/l). Tuy nhiên sau 84 giờ hàm lượng axit giảm nhanh vì ở dạng tự do Axit clavulanic rất kém bền rất dễ biến tính và mất hoạt tính sau 78 giờ trong môi trường thường. Vì vậy cần phải xác định chính xác thời gian tạo Axit clavulanic hiệu quả nhất để thu hồi sản phầm. Xạ khuẩn S. clavuligerus tự nhiên nuôi trong môi trường giàu khoáng có hàm lượng glucose là 20 – 22 g/l tạo ra hàm lượng axit là nhiều nhất còn ở các môi trường giàu khoáng có hàm lượng glucose khác thì làm lượng axit được tạo ra là ít hơn. Như vậy, hàm lượng cacbonhydrat quá cao hay quá thấp đều ảnh hưởng rất lớn đến khả năng sinh axit của xạ khuẩn S . clavuligerus tự nhiên: hàm lượng cacbonhydrat quá thấp thì không đủ dinh dưỡng cho sự phát triển còn hàm lượng cacbonhydrat quá cao thì lại ức chế sự tổng hợp axit của chủng. Với hàm lượng pepton là 4g/l lượng axit đạt cao nhất cho dù tăng thêm lượng pepton nhưng hiệu suất không tăng nhiều. Vì vậy nhóm lựa chọn 4,0 g/l là hàm lượng thích hợp. Với hàm lượng MgCl2 là 2,0 g/l thì lượng Axit clavulanic thu được là 128,5 mg/l. Tiến hành tăng thêm lượng MgCl2 nhưng hiệu suất không cao hơn nhiều. Vì vậy lựa chọn 2,0 g/l là hàm lượng MgCl2 thích hợp. Khảo sát pH từ 6 đến 8, trọng lượng ướt thu được từ 15,12 đến 20,8 g/l và hàm lượng CA là 98,9 đến 127,8 mg/l.Kết quả cho thấy pH=6,5 thì hàm lượng CA đạt cao nhất, cụ thể là 130,7 mg/l. Do đó lựa chọn pH=6,5 để tiến hành nghiên cứu môi trường nuôi cấy xạ khuẩn KẾT LUẬN: Điều kiện thích hợp cho lên men xạ khuẩn S. Clavuligerus trên thiết bị 100 lít: Tốc độ khuấy 200 vòng/phút; tốc độ cấp khí 0,7 lít khí/lít môi trường/phút, pH ban đầu 6,5; nhiệt độ lên men là 280C, thời gian lên men 84 giờ. Đã nghiên cứu lựa chọn thành phần dinh dưỡng, điều kiện và xây dựng quy trình lên men xạ khuẩn S. clavuligerus với thiết bị lên men 100 lít trong đó: Môi trường AMP có hàm lượng chất dinh dưỡng gồm: Glucose 20 g/l; pepton 4 g/l; khoáng MgCl2 2 g/l. Đã xây dựng được quy trình lên men và thu nhận Axit clavulanic từ dịch lên men quy mô 100 lít/mẻ.
541 ## $aTài liệu nội sinh
653 ## $aaxit clavulanic
653 ## $amen sinh tổng hợp
653 ## $axạ khuẩn Streptomyces clavuligerus
852 ## $a01 $bKho Luận văn $j(1): 01503095
856 1# $uhttp://thuvien.hou.edu.vn/houkiposdata2/luanvanluanankhoaluan/luanvan/2023/660.6/nguyenthilinh/nguyenthilinh_01thumbimage.jpg
890 ## $a1 $c1
×
![]()